双向电泳服务

双向电泳服务

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简介

  双向电泳(Two-dimensional electrophoresis,2D)是传统的经典蛋白分离方法。它可根据蛋白质的等电点(第一向)和分子量(第二向)的不同在一块胶上分离出几千种蛋白质,通过对蛋白质双向电泳的图谱扫描,用相关软件进行图谱差异分析,找到差别点。然后把差别点切出,进行脱色、酶解。最后样品进入质谱测试,得到质谱原始数据文件。通过数据库搜索可得到差别点蛋白质的详细信息。



技术路线



服务内容

1、双向电泳服务:(1)普通双向电泳(考马斯亮蓝染色或银离子染色);(2)荧光差异双向电泳(DIGE)。

2、电泳图像分析服务:利用凝胶图像分析系统,从图像中准确地挑选出差异蛋白斑点。

3、质谱分析服务:双向电泳蛋白斑点进行酶切消化与肽段纯化,进行一级和二级质谱鉴定差异蛋白。



服务优势

1、经验丰富。在细菌、真菌、培养细胞、各类动植物组织(如动物软硬组织、体液、植物种子、叶子等)、亚细胞组分的双向电泳分离中均有丰富的经验。

2、客户只需提供组织样本即可,我们可先做预实验,满意后再做正式实验。



结果示例

1、全局2D电泳图片


2、局部差异点

说明:在上图中,T-1和T-2是同一份总蛋白跑的两块胶(两次技术重复);C-1和C-2是同一份总蛋白跑的两块胶(两次技术重复)。可见技术重复非常好。红圈圈定的是软件挑选出的差异蛋白斑点。


3、质谱图


4、数据库检索结果



样品要求

1、植物样本组织150mg以上,血液样品至少1ml血清0.5ml,体液1ml,细胞样品为1×107个细胞,酵母、微生物等干重150mg以上

2、样品保存与运输:在液氮或-80°C保存。干冰运输。



参考文献

Li GY, Chen J, Xie P*, Jiang Y, Wu LY, Zhang XZ. Protein expression profiling in the zebrafish (Danio rerio) embryos exposed to the microcystin-LR. Proteomics (2011) 11: 2003–2018.