微生物群落多样性测序服务

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简介

   环境微生物多样性检测,是以样品中的微生物群落作为整体进行研究,通过对核糖体RNA高变区域(比如16S/18S/ITS测序)或功能基因(如古菌的氨氧化基因等)进行PCR扩增和测序,然后分析相应环境下微生物群落的多样性和分布规律。

  环境微生物群落多样性分析,一般是利用MiSeq 等第二代高通量测序平台,由于其测序读长较短,测序长度无法覆盖整个16S/18S/ITS 全长。而第三代测序仪Pacbio 由于序列读长长,可完整覆盖全长区域,所以在后期的分析中可以将微生物群落分类到种(species)。


生物信息分析

1. 原始数据整理、过滤及质量评估

2. OTU生成和注释

3. 基于物种丰度分析:    稀释曲线    丰度分布曲线    Alpha多样性分析    物种丰度差异分析

4. 基于群落结构分析:   单样品物种分布饼图    多样品物种分布柱图    含进化关系的物种丰度 Beta多样性分析

5. 根据客户需求进行个性化分析


结果展示

              单样品群落结构饼图



             多样品群落结构柱状图





         多样品分类学比对树状图

                      PCA分析图



样品要求

1、样品采集:样品采集条件的一致是最为重要的环节,严格按照采样标准采样,采样后立即封存样品冷冻保存。

2、样品DNA:环境因素异常复杂,许多物质或抑制因子影响后续PCR、测序文库构建和序列测定,常规提取方法不一定适合,建议采用专用试剂盒提取。提供浓度≥20 ng/μl,总量≥500 ng的基因组DNA,并确保电泳检测无明显RNA条带,基因组条带清晰、完整;基因组DNA完全无降解;提供DNA电泳检测照片,用自封袋密封后随样品一起送样。组织样品>1.5 g。

3、样品保存期间切忌反复冻融。

4、送样管务必标清样品编号,管口使用Parafilm膜密封。