简介

CRISPR/Cas9是最新的利用一段小RNA来识别并剪切DNA的靶向基因操作技术，多篇文章已经证明该技术可以高效进行细胞、动物、植物、酵母的靶向基因敲除和定点编辑。CRISPR/Cas9技术被Science杂志列为2013年度十大科学突破之一，2015年再次荣登Science十大科学突破之首，受到人们的高度重视。

CRISPR/Cas9技术特点

1、可实现对靶基因多个位点或多个基因同时敲除/敲入；

2、实验周期短，价格低；

3、可应用于大、小鼠、斑马鱼等，无物种限制。

一、CRISPR/Cas9快速构建试剂盒

载体特点

1、单个质粒同时表达Cas 9和gRNA；

2、优化的连接接头，无需酶切连接，阳性克隆率高达95%；

3、快速、方便、经济，只需5分钟即可进行转化；

4、多种载体可供选择，分别适用于动物、植物及难转染细胞，包括有哺乳动物/细胞、鸟类(家禽)/细胞、昆虫、单子叶植物、双子叶植物等专用载体。

试剂盒价格：2250元/5T，或3880元/10T。

试剂盒使用方法

载体种类

1、YX1-04：哺乳动物/细胞-Cas9/gRNA表达载体；红色荧光和抗性筛选标记

2、YX5-08：适用于双子叶植物，卡那霉素抗性

3、YX5-09：适用于单子叶植物，卡那霉素抗性

4、YX1-08：鸟类(家禽)/细胞-Cas9/gRNA表达载体；绿色荧光和抗性筛选标记

5、YX1-10:适用于昆虫细胞内表达cas9和gRNA,Zeocin抗性

二、Cas9体外酶切法检测gRNA靶点效率试剂盒

　　利用CRISPR技术进行基因敲除和编辑操作实验前，获得剪切活性高的gRNA靶点是实验成功的关键。Cas9/gRNA剪切活性与gRNA靶点的识别序列有关，每个gRNA的剪切活性都会不同。通常对一个基因设计多个gRNA靶点。本试剂盒通过Cas9/gRNA体外酶切靶点DNA片段，进行gRNA靶点活性的评估。

使用方法：

1、客户需以目标基因的基因组 DNA 为模板，PCR 扩增出带有 gRNA 靶点的DNA 片段；

2、用试剂盒体外转录gRNA，

3、用试剂盒的Cas9酶和gRNA进行酶切DNA 片段，电泳检测。

试剂盒价格：980元/5T，或2580元/30T。

结果示例：

三、Cas9质粒和mRNA等试剂

1、Cas9质粒：CAG或CMV启动子，用于细胞转染，以及体外转录出Cas9 mRNA，直接显微注射动物受精卵。价格为1200元。

2、Cas9 mRNA：可直接用于显微注射动物受精卵，价格为1880元/20μg或2580元/40μg。

3、gRNA：价格为1680元/10μg，2380元/20μg。

4、Cas 9核酸内切酶：在gRNA的引导下，对带有gRNA靶点的双链DNA进行酶切。价格为800元/20U或3200元/100U。

5、T7 核酸内切酶 I：应用于基因突变和SNP的检测，可应用于TALEN、CRISPR/CAS9形成的突变体检测。价格500元/300U或2200元/1500U。

6、T7体外转录试剂盒：价格1288元/30T。DNA转染试剂 Poly-Fecter，价格为1000元/1ml。特别适合于各种贴壁细胞的转染，对大多数贴壁细胞具有优秀的转染效率，也可以转染原代细胞和悬浮细胞。